靈芝母種製作技術

回答：使用馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml配製培養基，馬鈴薯去皮後切塊洗淨，加水1000毫升，文火煮沸30分鐘後過濾取汁，將瓊脂放入液體內文火煮沸，不斷攪拌至溶解，培養基煮好後趁熱分裝試管，塞上棉塞，包紮塑料薄膜，放入滅菌鍋，之後拿出斜放，冷卻後即凝固成斜面培養基。

一、準備用品與試劑

主要包括各種營養物質、高壓滅菌鍋、天平、棉塞、試管（20毫米×200毫米）、稀鹼液（1摩爾／升ＮａＯＨ溶液，即4克氫氧化鈉溶於100毫升水）、稀酸液（1摩爾／升鹽酸溶液，即84毫升濃鹽酸加水916毫升）等。

二、培養基配方

1、馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml。

2、馬鈴薯100g、麩皮100克、蔗糖20g、KH2PO4 1g，MgSO4 0.5g、瓊脂20g、水1000ml。

3、馬鈴薯200g、蔗糖20g、KH2PO4 2g，MgSO4 0.5g、維生素B1 20毫克、瓊脂20g、水1000ml。

三、培養基配製

1、馬鈴薯等塊莖、植物根去皮後切塊洗淨，加水1000毫升，文火煮沸30分鐘後過濾取汁，其他各種成分稱量要準確，配製過程中葡萄糖要最後加入，靈芝一般要求PH5.5-6，用稀鹼1摩爾/升Na〇H、稀酸1摩爾/升HC1來調整酸鹼度至適度爲止。將瓊脂（若爲條形需剪短）放入所配液體內，文火煮沸，煮時不斷攪拌至溶解。

2、培養基煮好後趁熱分裝試管，裝量爲試管長度的四方之一左右，然後塞上棉塞。傾倒時要防止培養基沾污管口，一旦沾上應用紗布擦淨。試管要事先洗淨，嚴防油污。棉塞用未脫脂普通棉花，大小、鬆緊適中，要求與管壁緊貼。

四、滅菌與培養

棉塞端包紮塑料薄膜，放入滅菌鍋，經高壓滅菌後，除去包紮的薄膜，直立於容器或框架內，使管內水蒸氣向外界散發，當溫度下降至50℃左右時（取試管1支貼放臉上，很燙但能放得住，約爲50℃左右），即可整捆斜放在斜面板上，斜面長度不超過管長的二分之一，冷卻後即凝固成斜面培養基。